作者：卓泓霞[1]、过丹丹 彭臻菲 林丹红 魏碧娜[2]
 
单位：[1]福州市马尾区妇幼保健院
          [2]福建卫生职业技术学院医学技术系 
 
阴道炎是十分常见且易反复感染的一种疾病，常见的阴道炎有细菌性阴道病（BV）、阴道假丝酵母菌炎（VVC）、滴虫性阴道炎（TV）和老年性阴道炎。
 
阴道分泌物检查是评价女性泌尿生殖道健康水平的重要指标。以往阴道分泌物常规检测内容是显微镜镜检法和Amsel法。显微镜镜检法在检测真菌和滴虫上较为准确可靠，但对细菌性阴道病的检测指标准确度不高；Amsel法检测存在对线索细胞的观察灵敏度低和经验要求高等不足。基于干化学酶法的阴道分泌物检测技术是近年发展起来的阴道炎快速诊断方法。本文以显微镜镜检法为参考方法，对干化学酶法诊断阴道炎的应用进行评价和研究，分析阴道分泌物的微生态分布，为临床阴道炎诊断提供科学依据。
 
一、资料与方法
 
1、标本来源
 
阴道分泌物来自就诊于福州市马尾区妇幼医院妇科门诊，年龄17-66岁，平均33岁，均未采取灌注疗法及使用阴道乳剂的患者。用无菌女性棉拭子尽可能多的收集患者阴道后穹窿处分泌物，避免在宫颈口处采集(pH值较阴道内高)，每位患者同时采集2份标本，1份涂玻璃片，滴加生理盐水，涂匀后显微镜镜检，观察白带中的白细胞、线索细胞、念珠菌和滴虫等有形成分并判断清洁度。另1份采用阴道炎干化学酶法九联试剂盒检测。从2020年8月到2020年12月，共456例。
 
2、试剂和方法
 
第1份标本做显微镜镜检分析，第2份标本做干化学酶法九项指标分析，阴道炎干化学酶法九联试剂盒购置迪瑞医疗科技股份有限公司，仪器采用迪瑞GMD-S600全自动妇科分泌物分析系统，检测pH值、白细胞酯酶（LE）、过氧化氢（H2O2）、乳酸（LA）、唾液酸苷酶（SNa）、脯氨酸氨基肽酶（PIP）、N-乙酰氨基己糖苷酶（NAG）、氧化酶（OX）、β-葡萄糖醛酸酶（GUS）9项指标。试验操作严格按说明书进行。
 
3、判定标准
 
（1）显微镜镜检法判定阴道分泌物清洁度标准：
 
Ⅰ级：杆菌多，球菌未见，上皮细胞满视野，白细胞0～5个/高倍视野(HP)；
Ⅱ级：杆菌少量，球菌少量，上皮细胞占1/2视野，白细胞5～15个/HP；
Ⅲ级：杆菌少，球菌多，上皮细胞少量，白细胞15～30个/HP；
Ⅳ级：杆菌未见，球菌大量，上皮细胞未见，白细胞＞30个/HP。
 
Ⅰ级和Ⅱ级为正常；Ⅲ级和Ⅳ级为异常，反映阴道局部炎症。
 
（2）显微镜镜检法诊断滴虫性阴道炎或真菌性阴道炎标准：
 
检测出滴虫和真菌认为是滴虫性阴道炎或真菌性阴道炎。
 
4、统计学处理
 
使用SPSS20.0统计软件，计数资料采用kappa检验、配对卡方检验、行－列表卡方和四个表卡方检验。当kappa≥0.75时表明两种方法一致性较好；当0.75＞kappa≥0.4时，表明一致性一般；当kappa＜0.4时，表明一致性较差。
 
二、结果
 
（1）干化学酶法与显微镜镜检法检测清洁度的符合性比较
 
阴道分泌物采用湿片显微镜镜检法，清洁度分级记做Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ级。Ⅰ和Ⅱ级判定为正常，记为-，Ⅲ和Ⅳ级判定为异常，记为+，表明存在阴道局部炎症。干化学酶法中的白细胞酯酶的定性结果-或+。两种清洁度判定结果见表1。
 
表1   白细胞酯酶与清洁度符合情况分析
 
 
干化学酶法中白细胞酯酶与白带常规湿片显微镜镜检诊断清洁度结果总符合率为80.0%，经一致性检验分析，Kappa=0.564，0.4
 
（2）显微镜镜检法和干化学酶法对细菌性阴道病检出效果评估
 
表2 显微镜镜检法和干化学酶法对BV检测结果比较
 
备注：七联指标包括pH、H2O2、SNa、PIP、GUS、OX、LE七个指标，其中任何一个指标阳性，即七联指标为阳性。
 
阴道分泌物分别用显微镜镜检法和干化学酶法（七联指标）判断为BV，检测结果见表2，两者率的比较采用χ2检验，χ2=121，P=0.0000
 
（3）显微镜镜检法和干化学酶法对真菌性阴道炎检出效果评估
 
表3 显微镜镜检法和干化学酶法对真菌性阴道炎检测结果比较
 
备注：两联指标包括pH、NAG 2个指标，NAG阳性且pH≤4.6为阳性。
 
阴道分泌物分别用显微镜镜检法和干化学酶法（两联指标）判断为真菌性阴道炎，检测结果见表3，两者率的比较采用χ2检验，χ2=241，P
 
（4）显微镜镜检法和干化学酶法对滴虫性阴道炎检出效果评估
 
表4 显微镜镜检法和干化学酶法对滴虫性阴道炎检测结果比较
 
备注：两联指标包括pH、NAG 2个指标，NAG阳性且pH≥4.8为阳性。
 
阴道分泌物分别用显微镜镜检法和干化学酶法（两联指标）判断为滴虫性阴道炎，检测结果见表4，两者率的比较采用χ2检验，差异非常显著(P=0.000，χ2 = 313)。与传统的显微镜镜检法相比较，干化学酶法（两联指标）诊断滴虫性阴道炎的敏感性为83.3%，特异性为99.5%，阳性预测值为83.3%，阴性预测值99.5%，两者符合率95.4%。
 
三、讨论
 
BV作为妇科常见的疾病，在细菌学上表现为生殖道产H2O2的乳酸杆菌正常菌群的数量减少，而另一组类杆菌属族、阴道加德纳菌、嗜血杆菌等厌氧菌群的数量增加的临床症候群。PIP是由阴道加德纳菌和动弯杆菌产生，是BV相关病原体所分泌的特异性标志酶，故阴道分泌物中存在PIP活性即可诊断BV[1，2]。国内学者周晓等[3]报道阴道菌群中除BV致病菌外，其他细菌仅产生少量或不产生PIP，所以PIP具有较高的特异性和阳性预测值。
 
本实验结果表明，阴道炎干化学酶法通过对PIP结合SNa的联合检测，将传统的阴道分泌物常规形态学检测提高到特异性生化标志物的检测，避免了传统检测方法的人为主观因素、标本保存条件、环境温度要求造成的检出率低、误检、漏判问题，提高了检测率和准确性，是一种较好的阴道分泌物常规检查法。
 
同时，对于滴虫性阴道炎这种全球性、十分常见的公共卫生性传播疾病，阴道炎干化学酶法通过对pH值和NAG活性的联合测定可判断真菌性或滴虫性阴道炎，不受白带标本的温度和离体时间的影响，可以弥补显微镜镜检法在温度低和离体时间长时滴虫检出率下降的缺点。
 
综上所述，使用迪瑞品牌九联检试剂盒对阴道分泌物进行检测简单易行，结果客观。该试剂盒检测项目全面，基本上包括传统显微镜能够检测的项目，且各项结果差异性较小，在细菌性阴道炎的诊断上更具优势，值得临床推广，但现阶段仍需结合显微镜镜检对妇科疾病诊断将会更有意义。
 
【参考文献】
 
[1]陈永琴,王利英. BV三项在阴道分泌物检测中的应用及临床结果分析［J］．中国微生态学杂志,2008,20( 1) : 84-85．
[2]Hillier SL. Diagonsis microbiology of bacterial vaginos-tic[J]. Am J Obstet Gynecol,1993,169:455-459
[3]周晓,廖渝.细菌性阴道病快速诊断试剂盒临床应用探讨[J].中国实用妇科与产科杂志,2001,17(2):542-544