作者:王艳玲

单位:河北医科大学第二医院鹿泉院区检验科


黄疸对于我们检验科来说并不陌生,它的存在对整个实验室的项目都会有一定的影响。如三大常规、免疫检测,特别是生化项目。


黄疸对检测项目的影响机制一直被检验界的同仁们研究探讨。有研究证实:胆红素作为一种还原剂,它可以中和试剂中的氧化物质,影响检测结果;其次,胆红素它还能自行氧化为胆绿素、胆褐素,使本底的吸光度发生变化,使光谱受到干扰,影响检验结果的准确性。除此之外,还有很多未发现的影响因素需要我们进一步探索,并从中找到解决方法。


案例分享


患者,男性,67岁,梗阻性黄疸入院。总胆红素:882.5umol/L、直接胆红素:383.5umol/L、间接胆红素:499.0umol/L;血常规检测结果:WBC 5.71×109/L、NE %15.47↓、LY %51.44↑、MO%31.68↑、EO %1.41、BA% 0、RBC 2.43×1012/L↓、 HB 84g/L↓、HCT% 24.1↓、PLT 296×109/L,如下图所示。


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检测结果提示白细胞散点图分布异常,仪器提示信息:“LY原始细胞;变体:LY;过量低RMALS事件;高事件比率:D”。达到复检规则要求,需手工法复检。


按照《全国临床检验操作规程》进行手工分类,镜下形态学结果,白细胞五分类:NE% 73、LY% 19、MO% 6、EO% 2、BA% 0,没有发现异型淋巴细胞和原始淋巴细胞等异型细胞,镜下形态学结果与仪器五分类结果相差甚远。查看当天仪器质控也在控,该样本前后的几个样本检测结果均无异常,仪器也没有故障报警。


此时,该样本已有血浆析出,血浆显示严重黄疸,会不会是黄疸对血常规检测产生影响所致呢?


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查阅文献了解到:重度黄疸(即总胆红素浓度大于150umol/L)对Coulter Maxm血细胞分析仪的白细胞分类结果有很大影响,而离心洗涤可以作为消除黄疸因素影响的有效方法。


我们科室使用的是贝克曼DXH800,采用的是VCS(Video Comparison Summary)法五分类,和文献Coulter Maxm血细胞分析仪采用的是同样的原理。


参考文献洗涤方法,样本经1500r/min离心5min,吸取上层血浆,并补充等量的稀释液。重新检测,以此来纠正白细胞五分类,检测后的结果为WBC 5.16×109/L、NE %74.65、LY% 15,52↓、MO% 5.05、EO% 4.07、BA% 0.71,基本和手工法白细胞五分类结果一致,白细胞散点图分布正常。可以证实该患者原始样本检测出的血常规结果是不准确、不可信的。   


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随后搜集本院门诊和住院病人10例,经生化检查总胆红素浓度大于150umol/L的患者,比较原样本仪器检测、离心洗涤后用等体积稀释液置换后仪器检测和手工法镜检结果的差异。


此表显示,重度黄疸样本1例(序号2)用DXH800血细胞分析仪无法测定白细胞分类,其他9例中,序号1和6两例样本白细胞分类CV>10%。


离心洗涤后的样本与手工法白细胞分类比较差异均不大。


查找文献后,认为高浓度胆红素会对VCS法白细胞五分类产生干扰。原因可能是高浓度胆红素样本虽然经稀释液稀释后,仍然保留一定浓度的胆红素,这部分胆红素极有可能与稳定剂起作用,从而不能使白细胞处于原态下进行测定,影响分类测定。并且白细胞进行分类测定时,周围保留的一定浓度胆红素产生的颜色干扰,也是影响分类测定的另一个重要原因。离心洗涤可以消除血浆因素(黄疸、重度溶血等原因)对VCS法分类的影响。


案例总结


在日常工作中,我们要认真对待每一份检验结果,对于血常规除了要重视直方图和散点图,也必须要重视仪器的报警信息,并结合患者其他检验结果和患者的自身情况综合分析。如果遇到高胆红素样本,对于仪器测定的白细胞五分类结果,我们一定要进行手工法复查,或是离心洗涤后用等体积稀释液置换后再重新测定,以确保结果的准确性。


【参考文献】

[1]朱红军 费选文 陈书裕 黄疸因素对 Coulter Maxm 血细胞分析仪 白细胞分类的影响 实用医学杂志 2000 年第 16 卷第 5 期

[2]郭洪晨 刘静 黄疸对临床检验结果的干扰及消除  检验医学与临床2009年9月第6卷第18期

[3]程正江 血红蛋白和胆红素干扰临床化学分析的机理初探  国外医学临床生物化学与检验学分册2004年11月第25卷第6期

[4]孙虹 牛华 赵崇吉 王凡 蒋宏君 胆红素、血红蛋白和乳糜微粒对生化检测结果的干扰评价  国际检验医学杂志2011年12月第32卷第21期